殺稻瘟菌素 S HCl(Blasticidin S HCl (10 mg/mL))

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殺稻瘟菌素 S 是從灰色鏈霉菌中分離出的一種肽基核苷類抗生素。它是細菌和真核細胞中蛋白合成的強效抑制劑,同時對真菌、線蟲和腫瘤細胞也具有活性。殺稻瘟菌素 S 通過阻斷釋放因子誘導的肽基-tRNA 水解而起作用,并抑制肽鍵形成。可用作哺乳動物細胞和細菌細胞的選擇劑。建議的工作濃度介于 1 至 30 μg/mL 之間,具體取決于細胞系,用于細菌選擇的濃度為 25–100 μg/mL。迅速發生細胞死亡,可在不到一周內生成對殺稻瘟菌素穩定耐藥的哺乳動物細胞系。

攜帶 BSR 和 BSD(分別從蠟樣芽孢桿菌 K55-S 和土曲霉中分離出)可獲得殺稻瘟菌素 S 抗性。BSR 抗性基因編碼殺稻瘟菌素 S 脫氨酶,該酶催化殺稻瘟菌素 S 轉化為脫氨基羥基殺稻瘟菌素 S。脫氨基羥基稻瘟菌素 S 是殺稻瘟菌素 S 的非生物活性衍生物,不與原核或真核核糖體相互作用,也不抑制原核或真核核糖體。BSD 抗性基因也編碼殺稻瘟菌素 S 脫氨酶,該酶催化與 BSR 脫氨酶類似的反應。為了進行細菌選擇,LB 培養基的鹽含量必須保持低水平(低于 90 mM),pH 值不應超過7.0,以維持殺稻瘟菌素 S 的活性。建議使用殺菌曲線,以確定殺滅非耐藥性細胞的殺稻瘟菌素 S 有效濃度下限。

應用
查看哺乳動物細胞、大腸桿菌和酵母菌中殺稻瘟菌素選擇的詳細方案



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